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孟加拉红培养基的培养条件与现象及作用原理与应用场景!

2026-02-02 15:38阅读:
孟加拉红培养基的培养条件与现象及作用原理与应用场景!


孟加拉红培养基是微生物学实验室中常用的选择性分离培养基,主要用于分离和计数食品、药品、环境样品中的真菌(尤其是酵母菌霉菌),同时抑制大多数细菌的生长,属于真菌检测的经典培养基之一。

一、培养基核心成分及作用原理

孟加拉红培养基的选择性和鉴别能力,依赖于多种成分的协同作用,核心成分及原理如下表所示:

核心成分 作用与原理

蛋白胨 提供真菌生长所需的氮源(如氨基酸、多肽)、维生素及生长因子,满足真菌基础代谢需求


葡萄糖 作为碳源,为真菌(异养生物)提供能量,支持其菌丝生长和繁殖

磷酸二氢钾(KHPO) 调节培养基 pH 值,维持环境稳定;此外还能提供磷元素,参与真菌核酸、ATP 合成

硫酸镁(MgSO?7HO) 提供镁离子,作为真菌体内多种酶的辅酶,促进代谢活动

孟加拉红(Rose Bengal)

1.抑制细菌生长:孟加拉红是一种酸性染料,能与细菌细胞膜上的蛋白质结合,破坏细胞膜完整性,对大多数革兰氏阳性菌和阴性菌有显著抑制作用;

2.限制真菌过度生长:低浓度孟加拉红可轻微抑制真菌菌丝的蔓延,避免单个菌落过度扩散覆盖整个平板,便于后续计数和分离;

3.显色作用:使真菌菌落或培养基背景呈现粉红色 / 红色,便于观察菌落形态

氯霉素(Chloramphenicol) 广谱抗生素,通过抑制细菌蛋白质合成,进一步抑制残留细菌生长,尤其对耐孟加拉红的少数细菌有补充抑制作用

二、培养条件

温度:25-28(真菌最适生长温度,低于细菌最适温度 37,进一步减少细菌干扰);

培养时间:3-5 天(酵母菌通常 2-3 天可形成明显菌落,霉菌因菌丝生长较慢,需 3-5 天甚至更长时间,具体根据样品类型调整);

氧气环境:需氧(大多数真菌为需氧或兼性需氧生物,无需厌氧条件)。

三、典型培养现象

孟加拉红培养基上的真菌(酵母菌、霉菌)与被抑制的细菌表现出明显差异,具体现象如下:

1、细菌:几乎被完全抑制

绝大多数细菌(如大肠杆菌金黄色葡萄球菌链球菌等)因孟加拉红的毒性作用和酸性环境,无法生长或仅形成微小、透明的“点状”菌落(无繁殖能力,很快停止生长),不会干扰真菌的观察和计数。

2、酵母菌:特征性菌落

酵母菌为单细胞真菌,菌落形态与细菌类似,但因培养基成分和孟加拉红作用,表现为:

菌落形态:圆形、凸起、边缘整齐(类似“小馒头”状),表面光滑、湿润(部分菌株可能干燥);

颜色:因孟加拉红染色,菌落呈粉红色或浅红色(颜色深浅与菌株种类相关),背景培养基为淡红色;

示例:酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae)菌落直径 2-4mm,粉红色,表面光滑;假丝酵母Candida spp.)可能形成边缘不整齐的菌落,部分可产生假菌丝。

3、霉菌:特征性菌丝与孢子

霉菌为多细胞真菌,可形成明显的菌丝和孢子,菌落形态易与酵母菌区分:

菌落形态:菌落较大(直径可达数厘米),质地疏松或绒毛状、棉絮状、粉末状(因菌丝和气生菌丝结构不同);

颜色:

初期:因菌丝无色,菌落可能呈白色或乳白色;

后期:随孢子成熟,菌落颜色会因孢子颜色不同而变化,但菌落边缘或培养基背景仍受孟加拉红影响,呈淡红色;

结构:部分霉菌(如根霉)可观察到匍匐菌丝和假根,青霉可观察到扫帚状分生孢子梗,曲霉可观察到放射状分生孢子头(需借助显微镜进一步鉴定)。

四、应用场景

孟加拉红培养基因选择性强、观察方便,广泛应用于:

食品行业:检测面包、果汁、乳制品、肉制品中的真菌污染(如霉菌毒素相关菌株);

药品行业:检测药品原料、制剂(如口服固体制剂、外用药膏)中的真菌限度;

环境监测:检测空气、土壤、水样品中的真菌种类和数量;

微生物教学:用于真菌形态观察和分离实验。

综上,孟加拉红培养基通过“酸性环境 + 染料抑制 + 抗生素(可选)”实现对真菌的选择性培养,再通过菌落形态、颜色差异区分酵母菌和霉菌,是真菌分离计数的核心工具之一。

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