新浪博客

骨骼肌细胞添加剂的核心原理与使用方法及要点!

2026-05-11 14:50阅读:
骨骼肌细胞添加剂的核心原理使用方法及要点





骨骼肌细胞添加剂是用于体外培养(原代细胞、成肌细胞、肌管等)的专用营养与生长因子混合物,核心作用是促进增殖、维持存活、诱导分化、抑制分化,并维持细胞表型。

一、核心添加剂(生长/增殖培养基)

商用添加剂通常为 100× 浓缩液,配入基础培养基(DMEM、DMEM/F12、SkMC 专用基础)。

1、血清类(基础营养)

胎牛血清 (FBS/FCS):5%–20%(增殖常用 5%–10%)

作用:提供黏附蛋白、生长因子、激素、脂质、微量元素

马血清 (HS):5%–10%(常用于分化或小鼠原代)

胎球蛋白 (Fetuin):50 μg/mL(促贴壁、促增殖)

2、重组生长因子(增殖关键)

表皮生长因子 (EGF):10 ng/mL

强促骨骼肌成肌细胞增殖、抑制分化

碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF/FGF2):1–5 ng/mL

促增殖、维持未分化状态、促存活

肝细胞生长因子 (HGF):2–10 ng/mL

激活肌卫星细胞、促迁移与增殖

3、激素与代谢因子

胰岛素 (Insulin):10 μg/mL

促葡萄糖摄取、蛋白合成、抗凋亡、促分化

地塞米松 (Dexamethasone):0.4 μg/mL (400 nM)

糖皮质激素,协同促增殖、增强生长因子响应

转铁蛋白 (Transferrin)、硒 (Selenium):

铁转运、抗氧化、无血清体系必需

4、其他关键成分

L - 谷氨酰胺 (2 mM):能量代谢、蛋白合成

抗生素 - 抗真菌剂(青霉素/链霉素/两性霉素 B):防污染

鸡胚提取物 (CEE):0.5%(原代分离/扩增常用)

二、分化培养基添加剂(促肌管形成)

从增殖切换到分化时,降低/去除血清、撤去 EGF/bFGF:

胰岛素:10 μg/mL(核心分化因子)

马血清 (HS):2%–5%(低血清)

无血清分化添加剂:胰岛素 + 转铁蛋白 + 硒 + BSA 等

三、使用要点

储存:添加剂 -20 避光;完全培养基 2–8 4–6 周

增殖 vs 分化

增殖:高血清 + EGF + bFGF → 快速分裂、保持单核成肌细胞

分化:低/无血清 + 胰岛素 → 细胞融合、形成肌管(MyHC+)

包被:培养皿用 明胶、多聚赖氨酸、Matrigel、I 型胶原 预处理,增强贴壁

北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!
骨骼肌细胞添加剂的核心原理与使用方法及要点!

我的更多文章

下载客户端阅读体验更佳

APP专享