实验二 卵黄中卵磷脂的提取和鉴定
2006-03-27 08:15阅读:
实验二
卵黄中卵磷脂的提取和鉴定
一、目和要求
1、了解卵磷脂的性质
2、学习提取卵磷脂粗品的方法
二、原理
机体的各种组织和细胞均含卵磷脂,在卵黄(约含10%)、神经、骨髓、肾上腺、心脏、磨菇和酵母等组织内含量更高。
纯卵磷脂是白色蜡状块,不溶于水,易溶于醇、氯仿、乙醚和二硫化碳中,但不溶于丙酮。
三、试剂
鸡卵黄、95%乙醇、10%氢氧化钠溶液、丙酮、活性炭
器材:烧杯、漏斗、玻璃棒、水浴锅、试管及试管架、试管夹、天平、量筒(25ml、10ml)、滤纸、三角铁架、棕色瓶1000ml
四、操作方法
1、提取:打蛋,取鸡卵黄约2克,放入小烧杯内(注意不要把蛋清过多地流到烧杯中)。加入15ml的95%乙醇溶液中,并同时搅拌。冷后滤入干燥试管内。如滤液混浊,需重滤,直到完全透明;(或加点活性炭)。将滤液在水浴锅上蒸干(70—80℃)。
2、三甲胺试验:取以上制得的卵磷脂一部分,放入干燥试管中,加10%氢氧化钠溶液2ml水浴锅上加热。卵磷脂分解生成胆碱,胆碱在碱的作用下,形成三甲胺。注意三甲胺的气味。
3、卵磷脂的溶解性:部分卵磷脂加入1ml乙醇,观察变化;另一些加丙酮1-2ml,观察变化。
4、卵清蛋白液的制作
卵清蛋白质(除去卵黄的鸡蛋白,约含蛋白质11%):加蒸馏水9倍搅拌,用2-3层的纱布过滤,滤液冷藏备用。
五、作业
实验报告