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实验三  蛋白质的性质(二)

2006-04-03 15:26阅读:
性质二:沉淀反应
一、目的:熟悉蛋白质的沉淀反应,包括盐析沉淀蛋白质、重金属盐类沉淀蛋白质、加热沉淀蛋白质、乙醇沉淀蛋白质等;进一步掌握蛋白质的有关性质。
二、原理:蛋白质是亲水胶体,依靠水膜和同种电荷维持稳定,如果在某些条件下蛋白质颗粒失去电荷或脱去水膜,那么蛋白质在溶液中就沉淀下来。按沉淀的溶解性不同可分为两类。
1、可逆沉淀反应
2、不可逆沉淀反应
三、器械:试管及试管架、移液管、滴管、水浴锅
四、试剂:卵清蛋白液、95%乙醇、晶体NaCl
0.5%醋酸铅液、1%硫酸铜液、3%硝酸银液、0.01%NaOH液、(NH4)2SO4晶体(如颗粒过大,需研碎)或(NH4)2SO4饱和液(蒸馏水100ml加至饱和)、10%醋酸液、10%NaOH液、饱和氯化钠液、0.1%醋酸液
五、操作:分别以下几个小实验进行。因电脑问题下面几个实验只列出实验原理.
实验1-----盐析作用沉淀蛋白质
一、 原理:向蛋白质液中加入中性盐至一定的浓度,蛋白质即沉淀析出。
实验2------重金属盐类沉淀蛋白质
一、原理
重金属盐易与蛋白质结合成稳定的复合物而沉淀。其原理是蛋白质在碱性溶液中(对蛋白质的等电点而言),其分子带负电荷与带正电荷的重金离子(如Hg2+ Fe2+ Cu2+ Pb2+ Ag2+)组合成不溶解的盐类而沉淀。

实验3------加热沉淀蛋白质
一、原理
几乎所有的蛋白质都可因加热而变性凝固。盐类的多少及氢离子浓度对蛋白质中热凝固起重要作用。当蛋白质在等电点时因不带电荷,加热凝固最完全和最迅速,在酸性和碱性溶液中,蛋白质分子带有正电荷或负电荷,稳定性增加,虽加热而不易凝固。电解质影响蛋白质的电荷。因此当有定量的中性盐类存在时,虽在酸性或碱性溶液中,蛋白质亦可因加热而凝固。
实验4------乙醇沉淀蛋白质
一、原理:乙醇其为脱水剂,能破坏蛋白质胶体质点的水化层而使其沉淀析出。
实训三作业:实验报告

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