一、实验原理
利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度,已显示其抑菌作用。实验通过抑菌圈大小判断其是否具有抑菌能力。
二、实验器材
100mm培养皿、离心管、移液器、超净台、计数板、生理盐水、生化培养箱、无菌蒸馏水、接种环、大豆酪蛋白琼脂培养基等。
菌种:
自然菌液: 吸取西宝生物实验室水槽,卫生间下水池,一楼下水管,以及大门口的养鱼池的水,一共大约20ml, 进行自然沉降,取上清液部分。
防腐剂:
1.Seebio KroVin300防腐剂(共四个批次,用P1、P2、P3、P4标识)
2.某进口品牌的P**300
三、实验步骤
1、实验工具准备及灭菌
2、培养基制备
称取10.5g培养基干粉,加入300ml纯化水,搅拌加热煮沸至完全溶解。再加入6g的葡萄糖,搅拌溶解。向各培养皿内注入约20ml的熔化状琼脂培养基(约45),待其冷却,备用。
3、防腐剂配制
用蒸馏水对不同类防腐剂分别按照1:250、1:500、1:1000、1:2000配制 ,做好标记。
4、菌悬液制备
取适量菌种加入生理盐水1ml,稀释10倍,采用平板计数法,稀释,得到10^6CFU/ml浓度菌悬液。
5、试验菌接种
10^6CFU/ml试验菌悬液0.2ml,将其接种到已经倒好培养基的培养皿内,用涂布棒涂布均匀(每次使用涂布棒前酒精灯下灭菌),盖好培养皿。
6、添加防腐剂
利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度,已显示其抑菌作用。实验通过抑菌圈大小判断其是否具有抑菌能力。
二、实验器材
100mm培养皿、离心管、移液器、超净台、计数板、生理盐水、生化培养箱、无菌蒸馏水、接种环、大豆酪蛋白琼脂培养基等。
菌种:
自然菌液: 吸取西宝生物实验室水槽,卫生间下水池,一楼下水管,以及大门口的养鱼池的水,一共大约20ml, 进行自然沉降,取上清液部分。
防腐剂:
1.Seebio KroVin300防腐剂(共四个批次,用P1、P2、P3、P4标识)
2.某进口品牌的P**300
三、实验步骤
1、实验工具准备及灭菌
2、培养基制备
称取10.5g培养基干粉,加入300ml纯化水,搅拌加热煮沸至完全溶解。再加入6g的葡萄糖,搅拌溶解。向各培养皿内注入约20ml的熔化状琼脂培养基(约45),待其冷却,备用。
3、防腐剂配制
用蒸馏水对不同类防腐剂分别按照1:250、1:500、1:1000、1:2000配制 ,做好标记。
4、菌悬液制备
取适量菌种加入生理盐水1ml,稀释10倍,采用平板计数法,稀释,得到10^6CFU/ml浓度菌悬液。
5、试验菌接种
10^6CFU/ml试验菌悬液0.2ml,将其接种到已经倒好培养基的培养皿内,用涂布棒涂布均匀(每次使用涂布棒前酒精灯下灭菌),盖好培养皿。
6、添加防腐剂
