原内容来自于：https://www.biomart.cn/experiment/430/465/473/55250.htm
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kda的蛋白选用0.45um的膜，小于20kda的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在使用时需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。PVDF膜具有较高的机械强度，是印迹法中的理想固相支持物材料。
Western Blot时该选择NC膜还是PVDF膜?
硝酸纤维素膜：硝酸纤维素膜（NC膜）是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲 液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起，虽然这其中的机制还不是十分清楚，但由于硝酸纤维素膜（NC膜）的这个特性，而且易于封闭非特异性结合，从而得到了广泛的应用。
在非离子型的去污剂作用下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，要选择不同 孔径的硝酸纤维素膜（NC膜）。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm，蛋白的转移就很难进行了。因此，我们通 常用0.45μm和0.2μm两种规格的硝酸纤维素膜。大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了，如果用 0.45μm的膜就会发生“Blowthrough”的现象。从膜的质地上来看，最重要的指标就是单位面积上能够结合的蛋白的量。
硝酸纤维素膜（NC膜）的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度有关
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kda的蛋白选用0.45um的膜，小于20kda的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在使用时需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。PVDF膜具有较高的机械强度，是印迹法中的理想固相支持物材料。
Western Blot时该选择NC膜还是PVDF膜?
硝酸纤维素膜：硝酸纤维素膜（NC膜）是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲 液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起，虽然这其中的机制还不是十分清楚，但由于硝酸纤维素膜（NC膜）的这个特性，而且易于封闭非特异性结合，从而得到了广泛的应用。
在非离子型的去污剂作用下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，要选择不同 孔径的硝酸纤维素膜（NC膜）。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm，蛋白的转移就很难进行了。因此，我们通 常用0.45μm和0.2μm两种规格的硝酸纤维素膜。大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了，如果用 0.45μm的膜就会发生“Blowthrough”的现象。从膜的质地上来看，最重要的指标就是单位面积上能够结合的蛋白的量。
硝酸纤维素膜（NC膜）的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度有关