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磷钼蓝比色法测定植物组织中磷的含量

2019-01-19 09:17阅读：

http://blog.sina.cn/dpool/blog/u/6903773088

检测原理
在一定的酸度和钼酸铵浓度下，溶液中的磷与钼酸铵作用生成黄色的磷钼酸，其反应如下：
(NH4)2MoO4+2HCl→H2MoO4+2NH4Cl
H3PO4+12H2MoO4→H3［P(Mo3O10)4］+12H2O
生成的磷钼酸，在一定量的氯化亚锡作用下，使部分钼(六价钼)被还原，形成蓝色的复杂化合物—磷钼蓝。在一定含磷浓度范围内，溶液蓝色的深浅与磷含量成正比。根据蓝色的深浅与标准色阶相比较，即可求出磷的含量。
测定步骤
制备标准色阶和供试液中磷含量的测定，可同时在比色盘中，按下表顺序进行。

磷测定步骤
操 作 步 骤

用量
单位
 标准色阶浓度(mg/L)
 供试液用
量（滴）
0.5
 1
 2
 4
 8
 12
制备显色用
准系列
 取混合标
准液浓度
 2mg/L
 滴
 1
 2
 4
 0
 0
 0
 4
16mg/L
 滴
 0
 0
 0
 1
 2
 3

滴
 3
 2
 0
 3
 2
 1
1．加2.1%钼酸铵盐酸液
 滴
 1
 1
 1
 1
 1
 1
 1
2．搅匀
 由低至高浓度逐穴搅匀
3．加0.1%氯化亚锡溶液
 滴
 1
 1
 1
 1
 1
 1
 1
4．搅匀
 由低至高浓度逐穴搅匀
5．比色读数
 5～15分钟内与标准色阶比较记下
读数
6．计算结果
 无机磷(mg/L)=读数*稀释倍数

注意事项
0.1%氯化亚锡在临用前由2%氯化亚锡甘油贮备液稀释制备当天有效，每次少配。
3—2.5植物组织中钾的测定(四苯硼钠比浊法)
溶液中的钾离子与四苯硼钠Na［B(C6H5)4］作用，生成难溶的四苯硼钾白色沉淀，使溶液呈现浑浊、其反应如下：
K++Na[B(C6H5)4]→K[B(C6H5)4]↓+Na+
在一定含钾浓度范围内，其混浊度与钾含量成正比，根据混浊程度与标准钾的浊度相比较，即可求出钾的含量。
测定步骤制备标准比浊系列与供试液中钾的测定，可同时在小试管(19×70毫米)中，按下表顺序进行。
有效钾测定步骤
操 作 步 骤
 用量
单位
 标准浊度系列浓度(mg/L)
 供试液用
量（滴）
5
 10
 20
 40
 60
 80
1． 制备比
浊用标准系
列
 取混合标准
液 浓 度
 20mg/L
 滴
 2
 4
 8
 0
 0
 0
 4
160mg/L
 滴
 0
 0
 0
 2
 3
 4
加 蒸 馏 水
 滴
 6
 4
 0
 6
 5
 4
2．加3％EDTA碱性溶液
 滴
 1
 1
 1
 1
 1
 1
 1
3．加37％甲醛
 滴
 1
 1
 1
 1
 1
 1
 1
4．搅匀
 逐管搅匀
5．加2％四苯硼钠溶液
 滴
 2
 2
 2
 2
 2
 2
 2
6．搅匀
 逐管搅匀
7．比浊读数
 5～15分钟内与标准浊度系列比浊
8．计算结果
 有效钾(mg/L)=读数值*稀释倍数

注意事项
试液中产生干扰作用的离子，主要有铵离子及其它一些三价、二价金属离子(如钙、镁、铁、铝等)须加入EDTA二钠盐及甲醛来掩蔽，以消除干扰。EDTA二钠盐即乙二胺四乙酸二钠盐能与二价、三价金属离子结合为无色络合物，甲醛与铵离子作用，能形成无色的六次甲基四胺，其反应如下：
4NH4++6HCHO→(CH2)6N4+6H2O+4H+
铵离子含量多时，在碱性条件下，甲醛才能有更好的掩蔽效果。
比浊读数可参考硝态氮测定中的注意事项。
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