新浪博客
境保存。
2、保存目的
短期使用（<6个月）：斜面低温保藏、液体石蜡覆盖法。
长期保存（数年）：冷冻干燥（冻干）、液氮超低温保藏。
频繁取用：甘油管保藏（-80）、磁珠保藏。
3、设备与成本
高预算实验室：液氮罐（-196）、冻干机。
基础条件：-80冰箱、普通冰箱（4或-20）。
低成本需求：斜面、砂土管、滤纸片法。
4、遗传稳定性要求
基因工程菌或易变异菌：优先选择冷冻干燥或液氮保存，减少传代次数。
5、法规与安全
病原菌或转基因菌：需符合生物安全规范（如双重容器密封、生物安全柜操作）。
二、常用保藏方法对比
三、操作流程与优化建议
1、菌种预处理
使用对数生长期菌体，确保高活力。
添加保护剂：甘油（终浓度15-25%）、脱脂乳（10%）、二甲基亚砜（DMSO，5%）等，减少冰晶损伤。
2、分装与密封
小体积分装（如0.5 mL/管），避免反复冻融。
严格密封（冻干管火焰封口、液氮保藏用耐低温冻存管）。
3、复苏验证
定期抽样检测存活率（如平板计数法）。
验证遗传稳定性（如PCR、代谢产物分析）。
四、特殊菌种保藏策略
1、极端环境微生物（嗜热菌、嗜盐菌）：
模拟原生境保存（如高盐甘油管保藏嗜盐古菌）。
2、病毒或噬菌体：
加50%甘油保存于-80，或冻干后4避光存放。
3、难培养微生物：
与宿主共保藏（如寄生菌与宿主细胞混合冻存）。
五、经济性与安全性平衡方案
1、分级保藏：
主库（液氮或冻干，长期备份）+ 工作库（-80甘油管，日常使用）。
2、低成本替代：
无冻干机时，可用硅胶干燥法（适用于产孢子真菌）。
六、案例参考
1、啤酒酵母工业菌种：
主库：液氮保藏（每5年复苏验证）；
分发库：-80甘油管（每月取用）。
2、实验室大肠杆菌：
-80甘油保藏（短期）+ 冻干备份（长期）。
七、结语
最优保藏方法需结合目的、资源、菌种特性动态选择。建议建立分级保藏体系（主库+工作库），定期检测活力和遗传稳定性。对于高价值菌种，液氮或冻干法优先；常规菌种可选用甘油管或斜面法，兼顾效率与成本。
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。
除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！
2、保存目的
短期使用（<6个月）：斜面低温保藏、液体石蜡覆盖法。
长期保存（数年）：冷冻干燥（冻干）、液氮超低温保藏。
频繁取用：甘油管保藏（-80）、磁珠保藏。
3、设备与成本
高预算实验室：液氮罐（-196）、冻干机。
基础条件：-80冰箱、普通冰箱（4或-20）。
低成本需求：斜面、砂土管、滤纸片法。
4、遗传稳定性要求
基因工程菌或易变异菌：优先选择冷冻干燥或液氮保存，减少传代次数。
5、法规与安全
病原菌或转基因菌：需符合生物安全规范（如双重容器密封、生物安全柜操作）。
二、常用保藏方法对比
三、操作流程与优化建议
1、菌种预处理
使用对数生长期菌体，确保高活力。
添加保护剂：甘油（终浓度15-25%）、脱脂乳（10%）、二甲基亚砜（DMSO，5%）等，减少冰晶损伤。
2、分装与密封
小体积分装（如0.5 mL/管），避免反复冻融。
严格密封（冻干管火焰封口、液氮保藏用耐低温冻存管）。
3、复苏验证
定期抽样检测存活率（如平板计数法）。
验证遗传稳定性（如PCR、代谢产物分析）。
四、特殊菌种保藏策略
1、极端环境微生物（嗜热菌、嗜盐菌）：
模拟原生境保存（如高盐甘油管保藏嗜盐古菌）。
2、病毒或噬菌体：
加50%甘油保存于-80，或冻干后4避光存放。
3、难培养微生物：
与宿主共保藏（如寄生菌与宿主细胞混合冻存）。
五、经济性与安全性平衡方案
1、分级保藏：
主库（液氮或冻干，长期备份）+ 工作库（-80甘油管，日常使用）。
2、低成本替代：
无冻干机时，可用硅胶干燥法（适用于产孢子真菌）。
六、案例参考
1、啤酒酵母工业菌种：
主库：液氮保藏（每5年复苏验证）；
分发库：-80甘油管（每月取用）。
2、实验室大肠杆菌：
-80甘油保藏（短期）+ 冻干备份（长期）。
七、结语
最优保藏方法需结合目的、资源、菌种特性动态选择。建议建立分级保藏体系（主库+工作库），定期检测活力和遗传稳定性。对于高价值菌种，液氮或冻干法优先；常规菌种可选用甘油管或斜面法，兼顾效率与成本。
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。
除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！