革兰阴性杆菌分科显色培养基的使用需遵循“准备 - 接种 - 培养 - 观察”的核心流程，关键是严格控制无菌操作和培养条件，以确保菌落显色准确、鉴定可靠。
一、使用前准备：确保培养基状态合格
使用前需完成培养基的复苏（若为干粉或冷冻状态）和质量检查，避免因培养基失效导致结果误差。
1、培养基处理
若为预制平板（市售即用型）：直接从 4冰箱取出，室温放置 20-30 分钟，待平板温度恢复至室温（避免接种后冷凝水影响菌落形态），同时检查平板是否有破损、污染（如出现不明菌落、霉斑）或干燥（培养基表面开裂），不合格者直接丢弃。
若为干粉培养基：需按说明书比例（如 1000ml 蒸馏水加 35g 干粉）溶解，加热煮沸至完全透明（避免反复煮沸），分装到培养皿中（每皿约 15-20ml），121高压蒸汽灭菌 15-20 分钟，灭菌后自然冷却至室温（倒置避免灰尘污染），凝固后 4密封保存，