离体蛙心灌流

实验题目：离体蛙心灌流
实验目的：
1.学习离体蛙心灌流的实验方法。
2.观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
实验原理：
1.心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动。本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境，观察心脏活动有何变化。
2.心肌细胞分类
快反应细胞：心房肌，心室肌，浦肯野细胞：主要由快钠通道被激活，Na快速内流引发动作电位，去极速度快，
慢反应细胞：窦房结细胞，房室交界区细胞：主要由慢钙通道被激活，Ca内流引发动作电位，去极速度慢。
动物、器材与药品：
蟾蜍、电脑、生物信息采集系统BL420E+、常用手术器材、蛙板、张力换能器、蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、长胶头滴管、5%NaCl溶液、2%CaCl溶液，1%KCl溶液、1:100,000肾上腺素溶液、1:1000,000乙酰胆碱溶液、烧杯等。
方法和步骤：
1.离体心脏的制备：
(1).取1只蟾蜍，破坏脑和脊髓，仰卧固定于蛙板上，用外科剪由剑突处向两锁骨肩峰端呈三角形剪开皮肤，用粗剪刀剪开胸壁，用镊子提起心包膜，用眼科剪将其剪开，暴露心脏。
(2).在两个主动脉干下各穿两根细线（一根用来结扎静脉，另一根用来结扎蛙心插管和主动脉），并将其中一根打一活结备用。
(3).将心脏上翻，辨认心房，静脉窦，静脉，然后结扎静脉。
(4).用左手提起结扎线，右手用眼科剪在左侧主动脉距分叉部2-3mm处剪一“v”型口。将盛有少量任氏液的蛙心套管(用拇指将套管堵住，以防套管中的任氏液流出)从“v”型口插入动脉球底部，然后稍后撤套管，再将蛙心管尖端转向蟾蜍的背侧及左下方，于心缩期插入心室内。插管如已进入心室，可见管中液面随着心搏而升降，此时即可将预置线的活结扎紧，并固定于插管壁的小钩上。
(5).小心提起套管和心脏，剪断主动脉左右分支；将心脏连同静脉窦一起剪下。
(6).吸去管内的血液，并用任氏液反复冲洗心室内的余血，以防血液