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短刺小克银汉霉的使用方法与实验内容！

2022-04-08 09:54阅读：

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短刺小克银汉霉的使用方法与实验内容！


短刺小克银汉霉，属霜霉目，白锈科，拉丁名为Cunninghamella blakesleeana。短刺小克银汉霉，细胞圆球状，在直角两个平面交替分裂形成四联状，一般细胞成对生，单生者罕见，不成链状排列。革兰氏阳性，不运动，兼性厌氧。在MRS培养基上菌落小，呈白色。沿洋菜穿刺线的生长物呈丝状。接触酶阴性，不产细胞色素。功用：产酸，调节胃肠道菌群，维持肠道微生态平衡。在动物体内对病原微生物有颉颃作用，可竞争性地抑制病原微生物，增强动物机体的免疫功能，产生有益的代谢产物，激活酸性蛋白酶的活性，参与机体的新陈代谢，防止有害物质产生。

一、菌种简介
平台编号：bio-11010

规格：冻干物
拉丁属名：Cunninghamella blakesleana
中文译名：短刺小克银汉霉
拉丁学名：Cunninghamella blakesleana
原始编号：大连M135
菌株来源：←东北科学研究所大连分所
直接来源国家：中国
保藏时间：11/12/1953
其他保藏编号
生物危害：四类
模式菌株：非模式菌株
菌株用途：研究
培养温度：25-28
培养基：0014
提供形式：冻干物
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
储存条件：冻干菌种和试管斜面请置于 6-10冷藏。

二、培养条件
PDA 培养基
马铃薯浸取液 1.0 L 葡萄糖 20.0g 琼脂 15.0g PH 7.0
[注]马铃薯浸取液配制方法：马铃薯洗净去皮，取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 30分钟后滤去马铃薯块，将滤液补足 1000ml。

三、菌种的使用与注意
1、使用方法：
直接加入配合饲料中或先按一定倍数稀释后，再加入饲料中混匀。也可预先活化后再发酵饲料或直接供动物饮用。具体用量参考产品使用说明。
2、注意事项：
储存时，提高水分含量则菌群活力明显下降。高温制粒时，必须对产品进行包被处理。不饱和脂肪酸对乳酸片球菌具有颉颃作用，配合日粮中添加乳酸片球菌，应尽量避免与添加的油脂直接接触。饲料中的钙也会明显影响乳酸片球菌的活性。

四、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、注意事项
1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、菌种恢复培养前，建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，如在说明建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成，有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。
3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。
4、恢复培养厌氧菌时，在操作过程中应严格控制厌氧条件：制作培养基时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气，使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站。

六、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂（应避免过多水蒸气影响菌种的复苏），用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、用无菌吸管吸取 0.3ml（建议勿超过 0.5ml）适宜的液体培养基(不添加琼脂)，滴入管内，轻轻振荡，待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状，在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中（不超过 2 支，中国微生物菌种查询网提供的培养基配方中有琼脂，请务必做成试管斜面配方中没有琼脂试管中液体培养基不超过 5ml），并在建议的条件下静止培养。
3、冻干管打开后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。
4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。
6、菌种复苏时，请务必记录好菌种的编号和制备批号，否则不予售后。


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