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弗吉尼亚链霉菌的培养方法与使用范围！

2022-11-10 10:31阅读：

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弗吉尼亚链霉菌的培养方法与使用范围！


弗吉尼亚链霉菌，革兰氏阳性；基内和气生菌丝发育一般，无横隔、不断裂分枝广泛，孢子丝直或波曲状,孢子为椭圆。在高氏一号琼脂培养基上无可溶性色素产生，菌落为扁平、淡紫色偏灰，基丝为象牙黄。可在营养琼脂培养基，葡萄糖-天门冬酰胺培养基，酵母膏-麦芽膏培养基贝奈特培养基上良好生长。生长温度范围为20～45，pH5.0～12.0。产生淀粉水解酶，无H2S产生，产生黑色素，不能利用纤维素生长，硝酸盐还原试验为阴性，不能使牛奶固化和胨化，明胶液化试验为阴性。

一、菌种简介
平台编号：Bio-57303
提供形式：冻干物
拉丁属名：Streptomyces Virginiae
中文名称：
弗吉尼亚链霉菌
属名：Streptomyces
种名加词：virginiae
其它中心编号：=ATCC 13161
来源历史：←美国ATCC
收藏时间：2002.7.11
资源归类编码：15131517101
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究
特征特性：孢子链呈螺旋状，孢子质呈红色系列，渗透物呈黄棕色或微红棕色，可能会产生浅褐色的可扩散色素。
生物危害程度：四类
致病对象：无
培养基：可溶性淀粉 20.0g，KNO3 1.0g，K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，琼脂 15.0g， 蒸馏水 1.0L，pH7.2～7.4。0.06kg/cm2灭菌30min。
培养温度：26
资源保藏类型：培养物
保存方法：-80冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
实物状态：有实物
共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享
源数据主键：11013
用途：研究；
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、菌株特点
1、该菌为需氧芽孢杆菌，细菌繁殖体G兰氏染色阴性呈紫色，细菌芽胞孔雀绿着色。其细菌繁殖体对培养基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上生长良好，表面粗糙呈米黄色。
2、适生长繁殖湿度为56－65，培养24h即可形成菌落，37下24h看不到菌落。
3、本生物指示剂载体为高级滤纸片，染菌量为5×105－5×106cfu/片或1×106cfu/片，封装在小纸袋内，热死亡时间为121，3.9 min阳性，19 min阴性；D10值1.3－1.9 min，符合美国药典第十一版规定标准。
4、该菌无毒，热抗稳定，在冰箱内4下保存一年抗力无明显下降，在常温（20左右）可保存1个月。

三、培养条件
1、营养肉汁琼脂：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCl 5.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1.0L，pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。pH7.0。121，15min。
2、需氧类型：好氧
3、培养温度：55

四、培养方法
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

五、使用范围
（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。
（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

六、注意事项
1、菌种常规培养时间：细菌1-2天，酵母3天，霉菌5-7天，大型真菌7-10天。
2、试管斜面种请尽快转接，不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我司不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全储存和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

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